一、 sham 手術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化流程（改良對(duì)照法）

1. 麻醉與體位
   • 10% 水合氯醛（3.5ml/kg，ip）聯(lián)合 2% 利多卡因（0.1ml 切口浸潤(rùn)）
   • 仰臥位固定，頸前區(qū)備皮，碘伏 - 酒精消毒 3 次
   • 術(shù)中維持肛溫 36.8±0.5℃（體溫維持儀控制）
2. 血管解剖操作
   • 頸前正中 2cm 縱切口，顯微鑷（精細(xì)度 0.1mm）分離胸骨舌骨肌
   • 暴露左側(cè)頸總動(dòng)脈（CCA）分叉部，游離頸外動(dòng)脈（ECA）、頸內(nèi)動(dòng)脈（ICA）各 5mm（保留迷走神經(jīng)）
   • 關(guān)鍵對(duì)照步驟：不結(jié)扎 ECA，僅用 8-0 絲線虛繞標(biāo)記（模擬線栓操作但不插入）
   • 生理鹽水沖洗術(shù)野，確認(rèn)無(wú)出血后逐層縫合（皮膚用 6-0 可吸收線皮內(nèi)縫合）
3. 術(shù)后復(fù)蘇
   • 恒溫毯（37℃）監(jiān)護(hù)至自主睜眼，單籠飼養(yǎng)（避免模型組干擾）
   • 術(shù)后 6h 內(nèi)每小時(shí)記錄呼吸頻率、角膜反射，皮下注射 0.9% NaCl（5ml/kg）補(bǔ)液

二、 假手術(shù)有效性驗(yàn)證（雙盲評(píng)估）

三、 對(duì)照周期管理（與模型組同步）

• 急性期（0-24h）：每 2h 觀察切口滲出，給予氨芐西林（20mg/kg，im）預(yù)防感染
• 亞急性期（2-3d）：每日稱量體重（降幅＜5%），記錄攝食量（≥15g/d）
• 特殊記錄：手術(shù)耗時(shí)（精確至分鐘，與模型組差值＜2min），出血量（棉球稱重法＜0.1g）

四、 組織學(xué)對(duì)照檢測(cè)（與模型組平行操作）

1. TTC 染色（術(shù)后 72h）
   • 取腦前經(jīng)升主動(dòng)脈灌流生理鹽水 200ml，2mm 冠狀切片（共 6 片）
   • 2% TTC 染色液（pH7.4，含 0.1% NaN3）37℃避光染色 25min
   • 圖像處理：ImageJ 測(cè)量梗死體積（假手術(shù)組預(yù)期＜1% 腦體積）
2. 血腦屏障檢測(cè)
   • 術(shù)后 72h 尾靜脈注射 2% 伊文思藍(lán)（4ml/kg），2h 后取腦
   • 腦組織勻漿離心（3000rpm，10min），分光光度計(jì)測(cè)上清 OD620 值
   • 假手術(shù)組 EB 含量＜5μg/g（模型組＞20μg/g）

五、 質(zhì)量控制要點(diǎn)

1. 操作標(biāo)準(zhǔn)化：由同一術(shù)者完成（累計(jì) MCAO 手術(shù)＞200 例），假手術(shù)操作增加 "血管分離 - 復(fù)位" 步驟（模擬線栓推送）
2. 盲法實(shí)施：神經(jīng)評(píng)分、標(biāo)本處理均由不知分組的實(shí)驗(yàn)員完成（雙盲編碼系統(tǒng)）
3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)預(yù)設(shè)：假手術(shù)組與模型組比較采用獨(dú)立樣本 t 檢驗(yàn)，P＜0.01 視為有意義差異